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目的 构建携带大鼠视黄酸核受体γ(retinoic acid receptor γ,RARγ)的重组腺病毒,为研究RARγ在骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)成神经分化中的作用奠定基础.方法 体外扩增大鼠RARγ基因,将其定向克隆至腺病毒穿梭质粒pAdTrace-TOX构建重组质粒pAdTrace-RARγ,并在BJ5183菌中与骨架质粒pAdEasy-1重组获得腺病毒载体pAd-RARγ,PacⅠ酶切后转染HEK 293细胞包装腺病毒.腺病毒Ad-RARγ感染大鼠MSCs,Real-time PCR和Western印迹检测 RARγ的表达.结果 PCR,酶切及测序均证实RARγ正确克隆至腺病毒质粒载体中,Ad-RARγ对MSCs感染率达60

作者:龚敏;毕杨;张赟;江伟;陈洁;魏小平;刘友学;李廷玉

来源:医学分子生物学杂志 2011 年 08卷 4期

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作者:
龚敏;毕杨;张赟;江伟;陈洁;魏小平;刘友学;李廷玉
来源:
医学分子生物学杂志 2011 年 08卷 4期
标签:
视黄酸核受体γ 重组腺病毒 视黄酸信号转导通路 骨髓间充质干细胞
目的 构建携带大鼠视黄酸核受体γ(retinoic acid receptor γ,RARγ)的重组腺病毒,为研究RARγ在骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)成神经分化中的作用奠定基础.方法 体外扩增大鼠RARγ基因,将其定向克隆至腺病毒穿梭质粒pAdTrace-TOX构建重组质粒pAdTrace-RARγ,并在BJ5183菌中与骨架质粒pAdEasy-1重组获得腺病毒载体pAd-RARγ,PacⅠ酶切后转染HEK 293细胞包装腺病毒.腺病毒Ad-RARγ感染大鼠MSCs,Real-time PCR和Western印迹检测 RARγ的表达.结果 PCR,酶切及测序均证实RARγ正确克隆至腺病毒质粒载体中,Ad-RARγ对MSCs感染率达60