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目的 构建携带趋化因子-Cxcl10 shRNA的慢病毒表达载体,并鉴定其在BV-2细胞中的沉默效果.方法 将含有针对小鼠Cxcl10的ShRNA序列克隆到pGC-LV载体中,包装浓缩后用293T 细胞测定病毒滴度.将Cxcl10 ShRNA慢病毒载体分别以感染复数MOI为1,10和100的条件感染BV-2细胞,72 h后采用real-time PCR技术和Western印迹检测shRNA对Cxcl10基因的沉默效果.结果 Cxcl10 ShRNA被成功构建入慢病毒表达载体pGC-LV,病毒滴度为5×108 TU/ml.用感染复数(MOI)为1或10的shRNA慢病毒感染BV-2细胞,可沉默约35

作者:卜慧莲;舒斌;王伟;高峰;田玉科

来源:医学分子生物学杂志 2013 年 10卷 5期

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作者:
卜慧莲;舒斌;王伟;高峰;田玉科
来源:
医学分子生物学杂志 2013 年 10卷 5期
标签:
慢病毒载体 趋化因子 基因沉默 短发卡RNA
目的 构建携带趋化因子-Cxcl10 shRNA的慢病毒表达载体,并鉴定其在BV-2细胞中的沉默效果.方法 将含有针对小鼠Cxcl10的ShRNA序列克隆到pGC-LV载体中,包装浓缩后用293T 细胞测定病毒滴度.将Cxcl10 ShRNA慢病毒载体分别以感染复数MOI为1,10和100的条件感染BV-2细胞,72 h后采用real-time PCR技术和Western印迹检测shRNA对Cxcl10基因的沉默效果.结果 Cxcl10 ShRNA被成功构建入慢病毒表达载体pGC-LV,病毒滴度为5×108 TU/ml.用感染复数(MOI)为1或10的shRNA慢病毒感染BV-2细胞,可沉默约35