目的 筛选出干扰小鼠转酮醇酶(TK)的短发卡RNA(shRNA)表达载体.方法 针对TK基因序列设计4条TK干扰序列:hMGFP-shRNA1、hMGFP-shRNA2、hMGFP-shRNA3、hMGFP-shRNA4,Pst Ⅰ酶切鉴定其序列.然后利用质粒转染小鼠肝癌细胞株Hepa1-6,用逆转录-聚合酶链式反应和酶活性方法检测转染TK shRNA后Hepa1-6细胞内TK mRNA和蛋白表达变化.结果 经酶切凝胶电泳证实shRNA载体构建正确,质粒筛选实验表明hMGFP-shRNA1质粒对TK基因的抑制作用最强.结论 成功构建表达靶向TK的shRNA重组质粒载体.
作者：郭静；刘瑞；赵蕾；钟春玖；丰慧根
来源：新乡医学院学报 2011 年 28卷 4期
