目的 体外构建编码人类表皮生长因子受体(EGFR)的短发卡状RNA(shRNA)的质粒表达载体,观察其对结肠癌LoVo细胞EGFR的特异性抑制作用以及对细胞凋亡的影响.方法 体外合成EGFR的DNA模板引物和Pgenesil-1质粒构建编码shRNA的表达载体.应用脂质体Lipofectamine 2000转染人结肠癌LoVo细胞,转染成功后以G418筛选4周,实时荧光定量RT-PCR(real time RT-PCR)和Western-blot检测EGFR的表达,流式细胞仪检测细胞凋亡.结果 成功的构建了针对EGFR的质粒表达载体.质粒载体成功转染后,EGFR mRNA表达下降了(81.3±2.8)
作者:顾昱;吴相柏;李拥军;尹宜发;李欣;邹立勇
来源:临床外科杂志 2007 年 15卷 6期