目的：探讨双向沉默Survivin和hTERT基因对结肠癌SW480细胞增殖和凋亡的影响，为结肠癌的基因治疗提供实验依据。方法设计并构建能够稳定转录shRNA并可分别及联合干扰Survivin和hTERT分子表达的质粒，将其转染结肠癌SW480细胞后，分阴性对照组、空白质粒对照组、 Survivin RNAi 组、hTERT RNAi 组和Survivin-hTERT RNAi组。转染48h后TRAP-PCR-ELISA法检测端粒酶活性，RT-PCR法检测Survivin和hTERT mRNA的表达，Western blot检测Survivin和hTERT蛋白的表达，流式细胞仪及cck-8法分别检测细胞凋亡和细胞增殖的变化。结果 Survivin-hTERT RNAi组SW480细胞端粒酶活性明显下降（ P ＜0.01）， Survivin-hTERT RNAi 组Survivin及hTERT的mRNA水平较正常对照组分别减低82.8％和73.6％（ P ＜0.01），蛋白表达抑制率分别为79.2％和66.7％（ P＜0.01）。实验各组中Survivin-hTERT RNAi组细胞增殖抑制率和凋亡率最高，分别为43.6％±0.1％和39.2％±2.3％（ P＜0.01）。结论 Survivin和hTERT双干扰质粒可明显下调Survivin和hTERT蛋白的表达，抑制结肠癌SW480细胞的增殖，促进其凋亡。
作者：肖琳；王平；董俊红；王守训；刘顺梅
来源：基础医学与临床 2015 年 1期
