目的:探讨人端粒酶逆转录酶(hTERT),癌基因蛋白(C-myc),存活素(Survivin),血管内皮生长因子(WGF)基因对人类鼻咽癌细胞生长的影响,以及同时编码四个基因的短发夹重组质粒对人鼻咽癌细胞生长抑制作用及机制.方法:利用基因重组技术构建一个同时靶向作用四个基因的短发夹双链RNA(shRNA)真核表达载体和靶向单独作用hTERTmRNA的shRNA真核表达载体,脂质体法转染人CNE-2Z细胞；试验分组:空白对照组BC组(不进行干扰),阴性对照组NC组(加入阴性质粒),A组(hTERT单基因质粒组),B组(多基因联合质粒组).激光共聚焦显微镜观察转染情况；MTT法检测细胞增殖活性；RT-PCR和Western blot法分别检测转染后细胞内各基因mRNA和蛋白表达情况.结果:MTT法检测,与BC相,NC组相比,A组和B组的细胞增殖活性均降低,与A组相比,B组的增殖活性降低更显著；RT-PCR,Western blot法,A组和B组mRNA和蛋白表达水平均降低,B组降低更显著.结论:四个基因共同参与了鼻咽癌细胞的发生和发展.多个基因的联合干扰与单基因干扰相比,能更高效下调各基因蛋白在鼻咽癌细胞的表达水平,更好抑制鼻咽癌细胞的增殖.
作者：张金慧；董明敏；宋英
来源：现代生物医学进展 2012 年 12卷 5期
