目的:研究白细胞介素?32(Interleukin?32, IL?32)可否诱导肝星状细胞LX?2表达基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9, MMP?9)。方法用不同浓度的IL?32γ与LX?2细胞共培养,收集细胞培养上清,用TRizol试剂提取细胞总RNA,用定量 PCR检测MMP?9 RNA表达水平, MMP?9蛋白质表达水平用酶联免疫吸附试验( enzyme?linked immunosorbent assay, ELISA)试剂盒检测。接下来将Nuclear factor kappa B ( NF?κB)亚基p50、 p65真核表达载体pCMV?p50、 pCMV?p65单独或联合转染LX?2细胞,48 h后收集细胞培养上清,酶联免疫吸附测定( enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)检测MMP?9蛋白质表达水平。将不同浓度的NF?κB抑制剂SN50加入IL?32γ与LX?2细胞共培养的培养液中,48 h后收集细胞培养上清,用ELISA检测MMP?9蛋白质表达水平。结果 IL?32γ可以诱导人LX?2细胞表达MMP?9,且其表达水平随IL?32γ浓度增加而增强; NF?κB亚基p50、 p65可以诱导LX?2细胞MMP?9表达增高; NF?κB抑制剂SN50阻断NF?κB通路可降低IL?32γ诱导的MMP?9表达。结论 IL?32γ通过活化NF?κB通路诱导LX?2细胞表达MMP?9, IL?32可能通过诱导肝星状细胞表达MMP?9参与肝纤维化形成。
作者:潘兴飞;张绍全;黄小萍;朱慧芬
来源:医学分子生物学杂志 2016 年 13卷 3期