目的 构建人乳腺癌细胞MDA-MB-231稳定过表达LINE-1(long interspersed nuclear element 1)细胞系,为研究LINE-1在乳腺癌的发生发展中的作用提供新的细胞模型.方法 将带有neo(neomycin)抗性基因的LINE-1表达质粒瞬时转染到细胞中,当质粒稳定整合到基因组时细胞能表达出Neo基因并获得抗性产物,这类细胞则能在含有G418的选择性培养基中存活下来;存活下来的细胞进行有限稀释得到单个细胞,条件培养基培养单细胞至长成单细胞克隆;采用普通PCR、琼脂糖凝胶电泳、Real time PCR对得到的单细胞克隆进行稳转效果验证.结果 通过质粒转染、G418药物筛选和有限稀释法得到LINE-1稳定高表达乳腺癌细胞系.结论 成功建立了人乳腺癌细胞LINE-1稳定高表达细胞系,为后续研究提供了细胞模型.
作者：张二少；石晓；孙玉洁
来源：医学分子生物学杂志 2018 年 15卷 2期
