目的 观察小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)抑制基因pdcd10表达后对肝癌细胞增殖能力的影响.方法 设计针对pdcd10基因的siRNA,将实验细胞分为3组,siPDCD10#1组(转染PDCD10-siRNA1)、siPDCD10#2组(转染PDCD10-siRNA2)、阴性对照组(negative control)转染无关序列,采用脂质体Lipofectamine 2000将siRNA转染肝癌细胞系BEL-7404、SMMC-7721.qRT-PCR和Western印迹分别检测细胞pdcd10的mRNA和蛋白质水平变化;CCK-8实验检测增殖能力的改变;平板克隆实验检测单个细胞克隆形成能力;流式细胞术检测细胞周期变化.结果 与阴性对照组相比,qRT-PCR和Western印迹结果显示PDCD10-siRNA能够下调pdcd10表达;CCK-8和平板克隆实验结果显示实验组细胞增殖能力下降(P<0.05);流式细胞术实验结果显示实验组细胞发生G0/G1期阻滞(P<0.05).结论 siRNA敲低pdcd10基因表达可显著抑制肝癌细胞增殖能力,pdcd10可能是肝癌治疗的潜在靶点之一.
作者:郭志华;熊诗诗;李海通;雒广渭;张瑞;张翔
来源:医学分子生物学杂志 2018 年 15卷 6期