目的探讨靶向survivin的siRNA转染肝癌细胞阻抑survivin表达,及其对肝癌细胞凋亡、增殖与细胞化疗敏感性的影响.方法设计合成特异性靶向survivin的siRNA序列.肝癌细胞株HepG2接种于6孔培养板内,分为5组:空白对照组、阴性对照组和低、中、高浓度转染组(分别给予50,100和200 nmol·L-1 siRNA转染).作用36 h后收集各组细胞.Western blot法检测各组细胞survivin蛋白表达情况,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测survivin mRNA表达水平,流式细胞术检测各组细胞增殖和凋亡指数,四氮唑盐(MTT)法检测氟尿嘧啶(5-FU)和顺铂(DDP)对各组细胞的生长抑制率.结果各浓度siRNA转染组细胞survivin蛋白和mRNA表达有不同程度减弱.各浓度siRNA转染组细胞凋亡指数明显高于对照组(P<0.05),高浓度转染组最明显(P<0.05).各浓度siRNA转染组细胞增殖指数明显低于各对照组(P<0.05),高浓度转染组最明显(P<0.05).等浓度化疗药物5-FU和DDP对各浓度siRNA转染组细胞的抑制率明显高于对照组(P<0.05),高浓度转染组最明显(P<0.05).结论不同浓度survivin siRNA转染能下调survivin蛋白和mRNA表达,诱导肝癌细胞凋亡,抑制细胞增殖,增加肝癌细胞对化疗药物的敏感性.
作者:王颖;蔡刚祥;吴亮
来源:医药导报 2006 年 25卷 7期