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目的 探究has-miR-9-5p对鼻咽癌细胞恶性生物学行为的影响及其靶向分子.方法 miR-9-5pmimic转染鼻咽癌CNE1细胞,RT-PCR检测miR-9-5p和转化生长因子β受体2(transforming growth factor receptor β2,TGFBR2) mRNA的表达水平;生物信息学预测miR-9-5p与TGFBR2的结合位点;荧光素酶报告基因检测miR-9-5p与TGFBR2的靶向关系;miR-9-5pmimic与pcDNA-TGFBR2单独或一起转染鼻咽癌细胞,蛋白质印迹检测TGFBR2的表达;细胞计数实验(CCK8)检测细胞活力;体外侵袭实验(transwell)检测细胞侵袭能力;划痕试验检测细胞迁移能力.结果 miR-9-5p mimic能明显抑制鼻咽癌CNE1细胞中TGFBR2的表达(P<0.01);野生型TGFBR2报告载体与miR-9-5p mimic共转后,细胞荧光素酶活性显著降低(P<0.01),而突变型载体则没有显著影响;TGFBR2过表达能减弱miR-9-6p mimic对宫颈癌细胞增殖速率、侵袭细胞数目、划痕愈合率的抑制作用(P<0.01).结论 miR-9-5p能抑制鼻咽癌细胞的增殖、侵袭和迁移,其作用机制与靶向抑制TGFBR2有关.

作者:李海峰;孙鹏

来源:医学分子生物学杂志 2018 年 15卷 6期

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作者:
李海峰;孙鹏
来源:
医学分子生物学杂志 2018 年 15卷 6期
标签:
miRNA TGFBR2蛋白 鼻咽癌 细胞增殖 细胞侵袭 细胞迁移
目的 探究has-miR-9-5p对鼻咽癌细胞恶性生物学行为的影响及其靶向分子.方法 miR-9-5pmimic转染鼻咽癌CNE1细胞,RT-PCR检测miR-9-5p和转化生长因子β受体2(transforming growth factor receptor β2,TGFBR2) mRNA的表达水平;生物信息学预测miR-9-5p与TGFBR2的结合位点;荧光素酶报告基因检测miR-9-5p与TGFBR2的靶向关系;miR-9-5pmimic与pcDNA-TGFBR2单独或一起转染鼻咽癌细胞,蛋白质印迹检测TGFBR2的表达;细胞计数实验(CCK8)检测细胞活力;体外侵袭实验(transwell)检测细胞侵袭能力;划痕试验检测细胞迁移能力.结果 miR-9-5p mimic能明显抑制鼻咽癌CNE1细胞中TGFBR2的表达(P<0.01);野生型TGFBR2报告载体与miR-9-5p mimic共转后,细胞荧光素酶活性显著降低(P<0.01),而突变型载体则没有显著影响;TGFBR2过表达能减弱miR-9-6p mimic对宫颈癌细胞增殖速率、侵袭细胞数目、划痕愈合率的抑制作用(P<0.01).结论 miR-9-5p能抑制鼻咽癌细胞的增殖、侵袭和迁移,其作用机制与靶向抑制TGFBR2有关.