探究microRNA-195-5p ( miR-195-5p) 对宫颈癌HeLa细胞侵袭和迁移能力及宫颈癌肿瘤移植模型小鼠存活的影响.方法 RT-PCR检测宫颈癌患者癌组织及癌旁组织、正常宫颈上皮细胞NC104和宫颈癌细胞株 HeLa、 CaSki、 C33A 和 SiHa 中 miR-195-5p 和血管内皮生长因子 A ( vascular endothelial growth factor A, VEGFA) 的mRNA水平. miR-195 mimic转染细胞, RT-PCR检测miR-19-5p和VEGFA的表达.荧光素酶报告实验验证miR-195-5p和VEGFA靶向关系. miR-195 mimic和 pcDNA VEGFA ( pc-VEG-FA) 分别或同时转染细胞, 免疫印迹检测VEGFA表达, MTT检测细胞增殖, 流式检测细胞凋亡, Tran-swell和划痕实验分别检测细胞侵袭和迁移能力, 免疫印迹检测Ki67、 Bcl-2、 Bax、 VEGF受体1 ( VEGF re-ceptor 1, VEGFR1)、基质金属蛋白酶-2 ( metalloproteinase-2, MMP-2) 和MMP-9的表达.建立宫颈癌移植瘤裸鼠模型, 记录小鼠存活情况及肿瘤体积, Tunnel检测肿瘤组织细胞凋亡情况, 免疫组化检测Ki67 表达, 免疫印迹检测VEGFR1、 MMP-2和MMP-9的表达.结果 与癌旁组织比较, 癌组织miR-195-5p表达水平明显降低, VEGFA表达水平明显升高; 与NC104细胞比较, miR-195-5p在多类宫颈癌细胞中表达显著升高, VEGF RNA水平明显降低. miR-195 mimic

作者：张巍；李芳；赵曼曼

来源：医学分子生物学杂志 2019 年 16卷 2期