目的 探索miR-185对抑郁症模型大鼠海马区神经细胞的影响.方法 采用实施慢性不可预知的轻度压力(chronic unpredictable mild stress,CUMS)模拟大鼠抑郁症模型.SD大鼠40只随机分为2组(n=20):对照组(Control)、 模型组(Model).记录两组大鼠体重、 检测大鼠糖水偏好及通过旷场实验对大鼠行为学进行评分.Western印迹检测海马组织血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)、 脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)、Bax、Bcl-2和Ki67的表达水平;qRT-PCR检测两组大鼠海马组织和原代海马神经元细胞的miR-185和VEGFA的mRNA水平.原代分离大鼠海马区神经细胞.荧光素酶报告实验验证miR-185与VEGFA靶向关系;细胞分为4组:健康组(Con-trol,从健康组大鼠分离)、 模型组(Model,从模型组大鼠分离)、miR-185 inhibitor(从模型组大鼠分离,并转染miR-185 inhibitor)组和miR-185 mock组(从模型组大鼠分离,并转染miR-185 mock);分别检测各组细胞的细胞活力(CCK-8法)、 细胞凋亡(流式细胞术)以及相关蛋白的表达水平.结果 与对照组相比,模型组海马组织miR-185表达水平升高(P<0.01),而VEGFA表达水平下降(P<0.01);且除Bax增加外,VEGFA、BDNF、Bcl-2和Ki67的表达水平较对照组减少(P<0.
作者:孙玉涛;王磊;贾翠娜;徐阳;黄艳艳;沈振明;赵安全
来源:医学分子生物学杂志 2021 年 18卷 4期