目的 探讨miR-142-5p靶向髓细胞白血病因子1(myeloid cell leukemin-1,MCL-1)对人胆管癌细胞QBC939上皮间质化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)及吉西他滨(Gemcitabine,GEM)化疗敏感性的影响.方法 体外培养胆管癌细胞QBC939及人正常胆管上皮细胞HIBEC,随机分为对照组、miR-142-5p阴性对照(NC)组和miR-142-5p模拟物(mimics)组.实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组QBC939细胞和HIBEC细胞中miR-142-5p和MCL-1 mRNA表达情况;划痕实验和Transwell实验分别检测各组QBC939细胞迁移和侵袭变化情况;蛋白印迹分析法检测各组QBC939细胞上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)、神经性钙黏附蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)表达变化;双荧光素酶报告实验验证miR-142-5p与MCL-1的靶向关系;使用浓度为0.625μg/mL GEM处理转染miR-142-5p后的QBC939细胞,同时设置对照组,MTT检测细胞增殖,Annexin V-FITC/PI试剂盒检测细胞凋亡.结果 与人正常胆管细胞HIBEC相比,胆管癌细胞QBC939中miR-142-5p呈低表达,MCL-1 mRNA呈高表达.经Targetscan Human数据库预测显示,miR-142-5p与MCL-1 mRNA 3'UTR区有结合位点.与MCL-1-3'UTR-WT+miR-142-5p NC组比较,MCL-1-3'UTR-WT+miR-142-5p mimics组荧光素酶活性降低(P<0.05).与对照组和miR-1

作者：刘宁；吴胜利；马富平；张大闯

来源：医学分子生物学杂志 2022 年 19卷 3期