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目的 对结核分枝杆菌复苏因子Rv2450c基因克隆、并测序正确后进行融合蛋白表达、纯化.方法 通过PCR扩增结核分枝杆菌H37Rv复苏因子Rv2450c基因,酶切,克隆至PGEM-T Easy质粒,测序确定插入片段的正确性,再克隆至表达载体pET30a中,并转化至BL21(DE3)中.经PCR鉴定阳性的菌液通过IPTG诱导,表达氨基端带6个连续组氨酸残基的Rv2450c蛋白,并纯化.结果 获得了结核分枝杆菌复苏因子Rv2450c基因,构建了重组表达质粒,得到融合了6个连续组氨酸残基的Rv2450c蛋白,纯度>90

作者:刘忠泉;张宗德;邢爱英;陈曦;李自慧;古淑香;贾红艳;杜博平;马玙

来源:国际呼吸杂志 2007 年 27卷 18期

知识库介绍

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刘忠泉;张宗德;邢爱英;陈曦;李自慧;古淑香;贾红艳;杜博平;马玙
来源:
国际呼吸杂志 2007 年 27卷 18期
标签:
结核 复苏促进因子 克隆 表达
目的 对结核分枝杆菌复苏因子Rv2450c基因克隆、并测序正确后进行融合蛋白表达、纯化.方法 通过PCR扩增结核分枝杆菌H37Rv复苏因子Rv2450c基因,酶切,克隆至PGEM-T Easy质粒,测序确定插入片段的正确性,再克隆至表达载体pET30a中,并转化至BL21(DE3)中.经PCR鉴定阳性的菌液通过IPTG诱导,表达氨基端带6个连续组氨酸残基的Rv2450c蛋白,并纯化.结果 获得了结核分枝杆菌复苏因子Rv2450c基因,构建了重组表达质粒,得到融合了6个连续组氨酸残基的Rv2450c蛋白,纯度>90