目的:基于基因组高通量测序技术筛选慢性阻塞性肺疾病(COPD)相关肺动脉高压患者血液中异常表达的环状非编码RNAs(circRNAs),并研究显著差异表达的hsa_circRNA_0001478对人肺动脉平滑肌细胞(hPASMCs)增殖及凋亡的影响。方法:本研究为实验研究。采用非随机抽样法选取2021年1月至12月在宁夏回族自治区人民医院呼吸内科住院的COPD肺动脉高压期患者、单纯COPD患者及健康人群的血液标本,采用RNA测序进行测序分析,并运用荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)验证外周血标本中超过10倍差异表达基因。通过RT-PCR验证hPASMCs中hsa_circRNA_0001478被敲低后的表达水平;运用细胞计数试剂盒实验检测细胞的增殖功能;Hoechst 33342实验通过对细胞核染色确定细胞的状态以检测细胞凋亡;Transwell实验检测细胞侵袭和迁移能力。结果:根据测序结果,挑选出在COPD合并肺动脉高压患者外周血中明显高表达的4种circRNAs:hsa_circRNA_0001478、hsa_circRNA_0006872、hsa_circRNA_0001859和hsa_circRNA_0016070,构建相对应的引物,并通过RT-PCR在COPD合并肺动脉高压患者进行验证,发现仅hsa_circRNA_0001478表达差异较为明显。构建的si-circ质粒可显著降低hsa_circRNA_0001478在hPASMCs中的表达,转染si-circ的细胞增殖、迁移及侵
作者:莫丽蓉;徐燕;马红红;周玮;董辉;杨朝;陈乾;李萍;耑冰
来源:国际呼吸杂志 2023 年 43卷 4期