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目的:探讨过氧化物还原酶4(Prdx4)蛋白对小鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响及相关机制.方法:免疫荧光明确Prdx4在人卵巢颗粒细胞(KGN)中的定位;利用Prdx4小干扰RNA(siRNA)转染小鼠卵巢颗粒细胞,以空白组作为对照,蛋白质印迹法检测Prdx4表达水平以验证干扰效果,并检测2组颗粒细胞凋亡相关因子[B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2关联X蛋白(Bax)和裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cleaved caspase 3)]及内质网应激相关因子[免疫球蛋白结合蛋白(BIP)、转录激活因子4(ATF4)、ATF6和CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)]的表达.利用流式细胞仪检测2组颗粒细胞凋亡率,电镜下观察2组颗粒细胞的内质网形态.结果:利用免疫荧光共定位明确Prdx4主要定位于颗粒细胞的内质网中.转染Prdx4-siRNA的小鼠颗粒细胞Prdx4表达水平低于空白对照组(P<0.01);下调Prdx4蛋白表达导致小鼠颗粒细胞凋亡率增加(P<0.05),促凋亡蛋白Bax及cleaved caspase 3蛋白表达水平增加(均P<0.01),抗凋亡蛋白Bcl-2蛋白表达下降(P<0.05).电镜下观察Prdx4-siRNA处理组内质网显著扩张,蛋白质印迹法显示Prdx4-siRNA处理组内质网应激相关蛋白BIP、ATF4及CHOP表达水平均高于空白对照组(均P<0.05).结论:Prdx4蛋白表达水平下调可通过促进小鼠颗粒细胞内质网应激进而导致颗

作者:邹小飞;梁秀茹;严正杰;崔毓桂;刘嘉茵;孟艳

来源:国际生殖健康/计划生育杂志 2022 年 41卷 2期

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作者:
邹小飞;梁秀茹;严正杰;崔毓桂;刘嘉茵;孟艳
来源:
国际生殖健康/计划生育杂志 2022 年 41卷 2期
标签:
过氧化物还原酶;内质网应激;卵巢;粒层细胞;细胞凋亡
目的:探讨过氧化物还原酶4(Prdx4)蛋白对小鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响及相关机制.方法:免疫荧光明确Prdx4在人卵巢颗粒细胞(KGN)中的定位;利用Prdx4小干扰RNA(siRNA)转染小鼠卵巢颗粒细胞,以空白组作为对照,蛋白质印迹法检测Prdx4表达水平以验证干扰效果,并检测2组颗粒细胞凋亡相关因子[B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2关联X蛋白(Bax)和裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cleaved caspase 3)]及内质网应激相关因子[免疫球蛋白结合蛋白(BIP)、转录激活因子4(ATF4)、ATF6和CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)]的表达.利用流式细胞仪检测2组颗粒细胞凋亡率,电镜下观察2组颗粒细胞的内质网形态.结果:利用免疫荧光共定位明确Prdx4主要定位于颗粒细胞的内质网中.转染Prdx4-siRNA的小鼠颗粒细胞Prdx4表达水平低于空白对照组(P<0.01);下调Prdx4蛋白表达导致小鼠颗粒细胞凋亡率增加(P<0.05),促凋亡蛋白Bax及cleaved caspase 3蛋白表达水平增加(均P<0.01),抗凋亡蛋白Bcl-2蛋白表达下降(P<0.05).电镜下观察Prdx4-siRNA处理组内质网显著扩张,蛋白质印迹法显示Prdx4-siRNA处理组内质网应激相关蛋白BIP、ATF4及CHOP表达水平均高于空白对照组(均P<0.05).结论:Prdx4蛋白表达水平下调可通过促进小鼠颗粒细胞内质网应激进而导致颗