目的克隆并构建编码结核分枝杆菌Ag85B分泌蛋白的重组表达质粒.方法采用聚合酶链反应(PCR)方法从结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA中扩增出Ag85B基因(978bp),并克隆到T载体,然后用双内切酶消化后,与同样酶消化的pGEX-4T-2连接,转入大肠杆菌E.coli DH5α,阳性克隆用酶切和DNA测序鉴定.结果酶切鉴定所切下的片段大小与预计相符,测序结果与文献报道一致,证实符合表达框架.结论成功地克隆并构建了Ag85B基因的重组表达质粒pGEX-Ag85BV.
作者：刘俊华；冯蝶仪；陈建波；陈郁筠
来源：国外医学(临床生物化学与检验学分册) 2003 年 24卷 5期
