目的 依据EDTA可渗透菌细胞内并促进β-内酰胺酶释放至外环境的原理,建立并评价检测大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌质粒介导的AmpC酶的改良头孢西丁平板试验(MCAM).方法 于含有2、4、6、8 μg/ml 的头孢西丁平板上接种过夜培养的大肠埃希菌ATCC25922,然后用直径5 mm的打孔器在琼脂表面均匀间隔打孔,于孔中分别加入0.5 mol/L EDTA 0、3、5、7、10 μl(使孔中约含EDTA分别为0、450、750、1 000、1 500 μg),各孔加待检菌悬液(>1011 CFU/ml)25 μl,35 ℃过夜培养.以孔周有细菌生长环为AmpCs阳性.以阴沟肠杆菌029M和大肠埃希菌ATCC25922作质控,用MCAM和酶粗提物三维试验(TDEM)同时检测临床分离的头孢西丁不敏感大肠埃希菌(14株)和肺炎克雷伯菌(13株)的AmpC酶,对两种方法进行比较.结果 MCAM试验应用6 μg/ml 头孢西丁平板和750 μg EDTA进行检测,其结果与TDEM试验完全一致.结论 该方法操作简便、结果易于判读,在一块平板上可同时进行多株菌的检测,适于各级临床微生物实验室应用.
作者:李金钟;刘利平;段雄波;刘青芹;李中华;王永明
来源:国际检验医学杂志 2007 年 28卷 5期