目的 探讨PCR-反向斑点杂交技术用于检测结核分枝杆菌及其耐药基因突变的效果,了解绍兴地区结核分枝杆菌耐药基因的突变情况.方法 根据结核分枝杆菌基因特征,运用反向斑点杂交技术构建特异性的PCR反应体系,并用10株非结核分枝杆菌、3株其他菌株(金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和鲍曼不动杆菌)和1株H37Rv结核分枝杆菌对该反应体系进行验证,同时用该体系对来源于绍兴市立医院的125份抗酸杆菌涂片阳性痰液样本及150株结核分枝杆菌进行5种耐药突变基因(rpoB、katG、inhA、embB、rpsL)的检测.结果 构建的PCR-反向斑点杂交体系用于10株非结核分枝杆菌、3株其他菌株的检测结果均为阴性,H37Rv标准株可检出,但未检出耐药突变位点.275份结核分枝杆菌样本中对4种抗结核药物均敏感的菌株有201份(73.1％),单药耐药20份(7.3％),耐多药54份(19.6％);共检出133个耐药突变位点,其中对利福平、异烟肼、链霉素和乙胺丁醇的耐药突变位点数分别为41个、51个、30个、11个;前5位突变位点为315M、43M、S531L、15M和H526Y.结论 绍兴地区耐药结核分枝杆菌以耐多药为主.构建的PCR-反向斑点杂交体系用于检测结核分枝杆菌特异性强、灵敏度高,可快速检测结核分枝杆菌的耐药基因.
作者：钟建平；金法祥；王华钧；许文芳；孙小军
来源：国际流行病学传染病学杂志 2015 年 42卷 4期
