目的:通过体外T细胞识别自体树突状细胞(dendritic cell，DC)加工递呈的乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)特异性抗原，探讨靶向HBV-C、E、X基因的细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocytes，CTLs)对体外靶细胞的特异性杀伤效应。方法:利用基因重组技术分别将HBV-C、HBV-E、HBV-X三种抗原负载至腺相关病毒(adeno-associated virus，AAV)上，获得重组腺相关病毒(recombinat adeno-associated virus，rAAV)。通过Ficoll法分离得到外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells，PBMC)，经HBV-C-rAAV、HBV-E-rAAV、HBV-X-rAAV分别转染单核细胞并诱导分化为成熟DC。上述DC分4组，分别为阴性对照组(未转染组)和HBV-C-rAAV/DC、HBV-E-rAAV/DC、HBV-X-rAAV/DC组(转染组)。通过流式细胞术检测rAAV的转染率，并检测DC表面的标志分子和DC分泌的细胞因子白细胞介素(interleukin，IL)-10、IL-12。将体外培养的T细胞分别与未转染组DC、HBV-C-rAAV/DC、HBV-E-rAAV/DC、HBV-X-rAAV/DC混合，利用混合淋巴细胞反应收获CTLs，利用流式细胞术检测CTLs表面的标志分子以及分泌的细胞因子干扰素-γ(interferon-γ，IFN-γ)，并用 3H-TdR掺入法检测T细胞的体外增殖能力。通过 51Cr释放实验计算CTLs对

作者：李雅琴；刘勇；江孝青；张慧；蔡月明；刘泽华；陈毅华；于岩岩；陈俊辉

来源：国际免疫学杂志 2022 年 45卷 3期