目的 探讨七氟醚预处理对大鼠心肌细胞缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)损伤中自噬变化的影响及机制. 方法 大鼠H9C2心肌细胞采用随机数字表法分为5组(免疫印迹每组4瓶细胞,共20瓶;细胞存活率检测时细胞培养在96孔板中,每组8孔,共40孔):空白对照组(Con组)、H/R组(缺氧4h、复氧2h)、七氟醚预处理组(Sev+H/R组,给予2.5%七氟醚预处理30 min后行H/R)、叔丁基过氧化氢(tert-butylhydroperoxide,TBHP)组(TBHP+H/R组,培养基内加入浓度为25 mmol/L TBHP后行H/R)和七氟醚预处理+叔丁基过氧化氢组(Sev+TBHP+H/R组,2.5%七氟醚预处理后于25 mmol/L TBHP的培养基行H/R).复氧结束后取心肌细胞,四氮唑蓝(thiazolyl blue tetrazolium bromide,MTT)检测细胞存活率,二氯荧光素法(dichlorofluorescein diacetate,DCFH-DA)检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量,免疫印迹法检测Ⅱ型微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein l light chain 3,LC3-Ⅱ)和Beclin l蛋白的表达. 结果 与Con组(100%)比较,H/R组和Sev+H/R组心肌细胞存活率[(52±14)%,(76±20)%]均降低(P<0.05),ROS的产生量均增加;其余4组Beclinl和LC3-Ⅱ的表达均升高(P<0.05).与H/R组比较,Sev+H/R组心肌细胞存活率增加(P<0.05),R
作者:王露;牛力;许鹏程
来源:国际麻醉学与复苏杂志 2015 年 36卷 9期