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目的:研究聚束蛋白(Fascin)shRNA对结直肠癌细胞生长的影响.方法:结直肠癌细胞HT29感染Fascin shRNA和shRNA control慢病毒,real-time PCR和Western印迹法分别测定细胞中Fascin mRNA和蛋白的表达水平,同时用Western印迹法检测细胞中的Notch1蛋白水平.用Notch1信号通路抑制剂DAPT处理下调Fascin后的HT29细胞,MTT测定细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期,Western印迹法检测周期蛋白p27、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)表达水平.结果:Fascin shRNA慢病毒感染后的细胞中Fascin转录和表达水平均降低,而shRNA control慢病毒感染对细胞中的Fascin表达水平没有影响.沉默Fascin的细胞增殖能力降低,细胞G0/G1比例升高,细胞中Cyclin D1蛋白水平降低,p27蛋白水平升高.沉默Fascin能够降低细胞中Notch1蛋白水平,并且Notch1信号通路抑制剂DAPT可以协同沉默Fascin,进一步抑制结直肠癌细胞增殖,阻滞结直肠癌细胞周期,减少Cyclin D1蛋白表达,促进p27蛋白表达.结论:Fascin shRNA通过抑制Notch1信号通路阻碍结直肠癌细胞增殖,将细胞周期阻滞在G0/G1期.

作者:余伟;张志标;马达

来源:临床与病理杂志 2019 年 39卷 2期

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作者:
余伟;张志标;马达
来源:
临床与病理杂志 2019 年 39卷 2期
标签:
结直肠癌 增殖 Notch1信号通路 Fascin
目的:研究聚束蛋白(Fascin)shRNA对结直肠癌细胞生长的影响.方法:结直肠癌细胞HT29感染Fascin shRNA和shRNA control慢病毒,real-time PCR和Western印迹法分别测定细胞中Fascin mRNA和蛋白的表达水平,同时用Western印迹法检测细胞中的Notch1蛋白水平.用Notch1信号通路抑制剂DAPT处理下调Fascin后的HT29细胞,MTT测定细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期,Western印迹法检测周期蛋白p27、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)表达水平.结果:Fascin shRNA慢病毒感染后的细胞中Fascin转录和表达水平均降低,而shRNA control慢病毒感染对细胞中的Fascin表达水平没有影响.沉默Fascin的细胞增殖能力降低,细胞G0/G1比例升高,细胞中Cyclin D1蛋白水平降低,p27蛋白水平升高.沉默Fascin能够降低细胞中Notch1蛋白水平,并且Notch1信号通路抑制剂DAPT可以协同沉默Fascin,进一步抑制结直肠癌细胞增殖,阻滞结直肠癌细胞周期,减少Cyclin D1蛋白表达,促进p27蛋白表达.结论:Fascin shRNA通过抑制Notch1信号通路阻碍结直肠癌细胞增殖,将细胞周期阻滞在G0/G1期.