目的:分析Notch1在黑素瘤发展过程中的作用和机制.方法:采用RT-PCR检测Notch1 mRNA在黑素瘤和正常黑素细胞中的表达,采用慢病毒转染技术构建Notch1过表达的黑色素瘤细胞系,CCK法检测细胞增殖能力,Transwell检测细胞侵袭能力,划线法检测细胞迁移能力,流式细胞术检测细胞凋亡能力,Western blot检测细胞Notch1过表达对PI3K/AKT信号通路中AKT磷酸化水平的影响.结果:黑素瘤细胞系MM200、Me1-CV、A2058和A375细胞中Notch1 mRNA水平明显高于正常黑素细胞系HemN-MP (P＜ 0.05).黑素瘤细胞A2058细胞中Notch1水平升高后,细胞的增殖速率显著提高,在48h、72h和96h转染组细胞增殖能力明显高于对照组(P＜0.05);Transwell结果显示Notch1水平升高可以显著增加穿过小室膜A2058细胞数量(P＜0.05);划线法结果显示24h转染组细胞迁移率明显高于对照组(P＜0.05);流式细胞检测结果显示转染组细胞早期凋亡率明显低于对照组(P＜0.05).Notch1水平增加后,AKT蛋白磷酸化水平明显提高,说明Notch1能够促进PI3K/AKT信号通路的激活.加入了Notch信号通路特异性阻断剂DAPT后,能够有效抑制Notch1过表达引起的AKT蛋白磷酸化的升高.结论:Notch1能够调节PI3K/AKT信号通路通过促进黑素瘤的发展,本研究为临床治疗黑素瘤提供了新的思路.
作者：地里夏提·库尔班；陈召
来源：中国美容医学 2019 年 28卷 1期
