为研究鸭乙型肝炎病毒核心抗原(DHBcAg)真核表达质粒的免疫原性,分析DHBcAg DNA疫苗诱导的体液免疫应答,首先借助生物信息学方法对鸭乙型肝炎病毒(DHBV) Core基因编码的氨基酸序列进行亲疏水性分析,分别构建DHBcAg全基因(E-DHBc263)及去除疏水性序列的DHBcAg片段(E-DHBc180)的真核表达质粒,间接免疫荧光检测结果显示可在COS7细胞内表达.进一步构建原核表达质粒p-DHBc263和p-DHBc180,仅p-DHBc180可表达蛋白,纯化后作为酶联免疫吸附试验(ELISA)包被抗原,用于DHBcAb的检测.分别用E-DHBc263和E-DHBc180免疫小鼠,采用间接ELISA检测DHBcAb.结果显示,E-DHBc180可诱导免疫小鼠产生DHBcAb免疫应答,加强免疫后效价可达1∶ 100～1∶ 400.结果提示,E-DHBc180可作为DHBcAg DNA疫苗,在DHBV感染鸭模型中评价其效果.
作者：蒋定锋；闫梁；贲海静；赵艳丰；秦智强；瞿涤
来源：微生物与感染 2009 年 4卷 3期
