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目的:通过提高肝星状细胞(HSC)中微小核糖核酸(microRNA-375,miR-375)的表达水平,探讨miR-375在肝纤维化进程中的作用及其靶向信号通路。方法通过瞬时转染将 miR-375mimic 或者miR-375 mimic negative control (NC)转染到大鼠肝星状细胞(HSC-T6),将细胞分为mimic组、NC组和空白对照组。通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、免疫印迹实验(Western blot)检测细胞中蛋白激酶B(Akt)基因、3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1(PDK1)基因表达水平的变化。分别用细胞流式技术、细胞计数实验(CCK-8)试剂盒和细胞迁移实验检测过表达的miR-375对 HSC-T6的细胞周期、增殖和迁移能力的影响。结果与其他两组相比,mimic 组细胞中Akt、PDK1含量明显下降(P<0.05),细胞停滞在G0/G1期的比例升高(P<0.05)、增殖受到抑制(P<0.05),细胞迁移的差异无统计学意义(P>0.05)。结论miR-375可抑制HSC的增殖,负性调控肝纤维化进程。

作者:陈征;刘晓峰;麻树霖

来源:国际消化病杂志 2016 年 36卷 6期

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作者:
陈征;刘晓峰;麻树霖
来源:
国际消化病杂志 2016 年 36卷 6期
标签:
miRNA-375 肝纤维化 转染 信号通路 miRNA-375 Hepatic fibrosis Transfection Signaling pathway
目的:通过提高肝星状细胞(HSC)中微小核糖核酸(microRNA-375,miR-375)的表达水平,探讨miR-375在肝纤维化进程中的作用及其靶向信号通路。方法通过瞬时转染将 miR-375mimic 或者miR-375 mimic negative control (NC)转染到大鼠肝星状细胞(HSC-T6),将细胞分为mimic组、NC组和空白对照组。通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、免疫印迹实验(Western blot)检测细胞中蛋白激酶B(Akt)基因、3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1(PDK1)基因表达水平的变化。分别用细胞流式技术、细胞计数实验(CCK-8)试剂盒和细胞迁移实验检测过表达的miR-375对 HSC-T6的细胞周期、增殖和迁移能力的影响。结果与其他两组相比,mimic 组细胞中Akt、PDK1含量明显下降(P<0.05),细胞停滞在G0/G1期的比例升高(P<0.05)、增殖受到抑制(P<0.05),细胞迁移的差异无统计学意义(P>0.05)。结论miR-375可抑制HSC的增殖,负性调控肝纤维化进程。