目的 本研究旨在探讨miRNA-181a影响过氧化氢(H2O2)诱导的人晶状体上皮细胞(HLE-B3)凋亡的能力.方法 通过构建基于慢病毒的RNAi质粒方法建立miR-181a模型,使用实时定量逆转录聚合酶链反应(quantitative reverse transcription PCR,qRT-PCR)测定两个细胞凋亡相关基因(caspase-3和BAX)和三个潜在的miR-181a目标基因c-MET、环氧合酶-2(COX-2)、Snail家族锌指基因-2(Slug)的表达水平.通过酶联免疫吸附(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定评估丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和过氧化氢酶(catalase,CAT)水平.结果 证明了在转染pLKO.1-puro-miR-181 a慢病毒质粒后,HLE-B3细胞中的miR-181 a下调(P=0.0008).沉默miR-181 a能够逆转由H2O2诱导的细胞活性降低凋亡.此外,miR-181a下调也伴随着caspase-3和BAX的表达的下调以及COX-2和MDA表达降低(P=0.0089).结论 敲除miR-181a能够逆转由氧化应激诱导的HLE-B3细胞凋亡.这种保护性的潜在分子机制可能与caspase-3信号通路相关.
作者：王超；陈文静；冯广忠；陈怡；施展
来源：国际遗传学杂志 2018 年 41卷 2期
