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目的 探讨核心蛋白多糖(DCN)对高糖条件下人晶状体上皮细胞(LECs)凋亡及氧化应激水平的影响.方法 体外培养人LECs(HLE-B3),采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测不同浓度DCN对HLE-B3细胞存活力的影响,筛选出合适的DCN作用浓度.取对数期细胞分为正常对照组、DCN单纯处理组、高糖组和DCN+高糖组.采用流式细胞术检测细胞凋亡率及细胞内活性氧簇(ROS)表达水平,采用酶标仪检测细胞总超氧化物歧化酶(SOD)活性及还原型谷胱甘肽(GSH)与氧化型谷胱甘肽(GSSG)比值,采用Westernblot法检测凋亡蛋白bax和bcl-2的表达. 结果 对数生长期HLE-B3细胞呈梭形,大小均匀,细胞核居中,细胞排列整齐.CCK-8法检测结果显示,在0、10、50、100和200 nmol/L DCN处理HLE-B3细胞后24 h,各组HLE-B3的细胞存活率均大于90%,差异无统计学意义(P>0.05).细胞培育48 h,DCN单纯处理对HLE-B3细胞的凋亡率无影响,差异无统计学意义(P>0.05);高糖组细胞凋亡率明显高于正常对照组,DCN+高糖组细胞凋亡率明显低于高糖组,差异均有统计学意义(均P=0.000).高糖组细胞内ROS平均荧光强度高于正常对照组,DCN单纯处理组ROS平均荧光强度较高糖组降低,差异均有统计学意义(均P=0.000).高糖组总SOD酶活性比正常对照组和DCN单纯处理组低,差异均有统计学意义(P=0.007、

作者:谢丹丹;杜珊珊;祁颖;邵敬芝;张凤妍

来源:中华实验眼科杂志 2019 年 37卷 4期

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作者:
谢丹丹;杜珊珊;祁颖;邵敬芝;张凤妍
来源:
中华实验眼科杂志 2019 年 37卷 4期
标签:
核心蛋白多糖 人晶状体上皮细胞 高糖 氧化应激 细胞凋亡 抑制 机制 Decorin Human lens epithelial cell High glucose condition Oxidative stress Apoptosis Inhibitory effect Mechanism
目的 探讨核心蛋白多糖(DCN)对高糖条件下人晶状体上皮细胞(LECs)凋亡及氧化应激水平的影响.方法 体外培养人LECs(HLE-B3),采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测不同浓度DCN对HLE-B3细胞存活力的影响,筛选出合适的DCN作用浓度.取对数期细胞分为正常对照组、DCN单纯处理组、高糖组和DCN+高糖组.采用流式细胞术检测细胞凋亡率及细胞内活性氧簇(ROS)表达水平,采用酶标仪检测细胞总超氧化物歧化酶(SOD)活性及还原型谷胱甘肽(GSH)与氧化型谷胱甘肽(GSSG)比值,采用Westernblot法检测凋亡蛋白bax和bcl-2的表达. 结果 对数生长期HLE-B3细胞呈梭形,大小均匀,细胞核居中,细胞排列整齐.CCK-8法检测结果显示,在0、10、50、100和200 nmol/L DCN处理HLE-B3细胞后24 h,各组HLE-B3的细胞存活率均大于90%,差异无统计学意义(P>0.05).细胞培育48 h,DCN单纯处理对HLE-B3细胞的凋亡率无影响,差异无统计学意义(P>0.05);高糖组细胞凋亡率明显高于正常对照组,DCN+高糖组细胞凋亡率明显低于高糖组,差异均有统计学意义(均P=0.000).高糖组细胞内ROS平均荧光强度高于正常对照组,DCN单纯处理组ROS平均荧光强度较高糖组降低,差异均有统计学意义(均P=0.000).高糖组总SOD酶活性比正常对照组和DCN单纯处理组低,差异均有统计学意义(P=0.007、