背景糖尿病性白内障是糖尿病的主要眼部并发症之一,包括皮质性、核性、囊膜下性及混合型白内障,其表型可能与晶状体上皮细胞(LECs)的不同病理改变有关,而糖尿病囊膜下性白内障是常见的表型之一.研究糖尿病囊膜下性白内障LECs的生物学行为对相关药物的研发和相关疾病的治疗有重要临床意义. 目的 探讨Src-家族酪氨酸蛋白激酶(SFKs)在高糖诱导的人LECs凋亡及上皮-间质转分化(EMT)中的作用. 方法 将人LECs系HLE-B3细胞分为正常对照组、高糖组和PP1组,分别在含5.5 mmol/L葡萄糖的DMEM、含35.5 mmol/L葡萄糖的DMEM及含35.5 mmol/L葡萄糖+10 μmol/L SFK特异性抑制剂PP1的DMEM中培养24 h.分别于细胞培养后3、6、12和24 h采用流式细胞术检测各组细胞的凋亡率;用倒置显微镜观察各组细胞的形态学变化;采用免疫荧光染色检测细胞中EMT标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的相对表达量;并用Western blot法检测p-Src418(活化的c-Src激酶)及凋亡相关蛋白bcl-xl、survivin、caspase-3,EMT相关蛋白E-cadherin、α-SMA的表达变化. 结果 高糖组人LECs中p-Src418的表达增高,并在培养6h时达峰值,正常对照组、高糖组和PP1组人LECs中p-Src418的相对表达量(相对灰度值)分别为0.042±0.011、0.125±0.036和0.

作者：刘蕊；周健；李宝海；陈媛媛；李东旭

来源：中华实验眼科杂志 2015 年 33卷 6期