目的 制备生物素随机标记的卡介苗(Bacillus Calmette-Guérin,BCG)小RNA(small RNA,sRNA)探针,用于BCG sRNA的验证.方法 以BCG的sRNA-ASdes为目的基因,构建ASdes的克隆质粒pMD 18-T/ASdes,经T7 RNA聚合酶体外转录,获得生物素随机标记的ASdes(3'T7) bio-RNA探针,利用诺瑟杂交(Northern blot)和斑点杂交(Dot blot)验证该探针的敏感性.结果 以ASdes(3'T7) bio-RNA为探针,当BCG总RNA为7μg时,可用Northern blot检测到阳性信号.结论 体外转录获得的生物素随机标记ASdes(3'T7) bio-RNA探针的敏感性较好,可广泛应用于Northern blot检测sRNA.
作者：吴金银；吴桐；张凤民；赵吉子
来源：国际遗传学杂志 2018 年 41卷 5期
