目的建立稳定的补体C5a受体(C5aR)拮抗剂筛选平台.方法采集人外周静脉抗凝血,与不同浓度C5a、脂多糖及PMX-53孵育10～30min.通过流式细胞术检测中性粒细胞表面CD11b的表达,溶菌酶检测试剂盒观察中性粒细胞分泌溶菌酶的能力变化,罗丹明-123检测中性粒细胞呼吸爆发的变化,ELISA检测细胞上清液中白细胞介素(IL)-8的表达变化,Western Blotting检测胞外信号调节激酶(ERK)、蛋白激酶B(AKB或AKT)含量及其磷酸化水平的变化,考察补体C5a刺激及使用阳性药物PMX-53后对各生化指标的影响.结果 C5a刺激人外周血可增强中性粒细胞CD11b的表达,促进溶菌酶释放和IL-8的分泌,激发呼吸爆发,上调ERK、AKT的含量和磷酸化水平,阳性药物PMX-53则能显著抑制C5a的上述生物学效应.结论成功建立C5aR拮抗剂人全血体外筛选平台,为C5aR拮抗剂筛选及功能研究奠定了基础.
作者：王会会；陈国江；杨跃梅；魏化伟；王立燕；彭晖；李新颖；王一；黎燕；石艳春
来源：国际药学研究杂志 2011 年 38卷 1期
