目的 探讨微小RNA-1291(miR-1291)对肾癌细胞中锌指蛋白8(PHF8)基因表达的调控作用和对肾癌细胞周期及增殖的影响.方法 实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测肾癌细胞株OS-RC-2、ACHN、A498、786-O和人类近端肾小管上皮细胞HK-2中miR-1291表达水平,以表达量最低的肾癌细胞株为实验对象分别转染miR-1291(miR-1291组)和miR-NC(miR-NC组).qRT-PCR检测转染后细胞中miR-1291和PHF8 mRNA的表达水平.Western blotting检测PHF8、细胞周期蛋白依赖性激酶6(CDK6)和Cyclin D1蛋白的表达水平.双荧光素酶报告基因系统检测miR-1291对PHF8转录活性的影响.流式细胞术检测细胞周期分布.四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验和集落形成实验分别检测细胞活力和增殖能力.结果 肾癌细胞株OS-RC-2、ACHN、A498、786-O和人类近端肾小管上皮细胞HK-2中miR-1291的表达量分别为0.64±0.17、0.60±0.15、0.29 ±0.08、0.63 ±0.08、1.01 ±0.17,差异有统计学意义(F=13.790,P<0.001).与肾癌细胞株OS-RC-2、ACHN、786-O相比,A498细胞株中的miR-1291表达量最低(P =0.002,P=0.006,P=0.003).转染后的miR-NC组和miR-1291组A498细胞中miR-1291表达量分别为1.00±0.03和775.25±329.91,差异有统计学意义(t=4.694,P=0.003);PHF8mRNA表达量分别为1.00 ±
作者:叶志华;黄耿;付金伦;桂定文
来源:国际肿瘤学杂志 2018 年 45卷 3期