目的:研究长非编码RNA(lncRNA)肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1(AFAP1-AS1)对甲状腺癌细胞增殖和侵袭的影响,并探讨其机制。方法:采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测正常甲状腺和甲状腺癌细胞株中AFAP1-AS1的表达。将甲状腺癌细胞株WRO分成3组,AFAP1-AS1沉默表达组(AFAP1-AS1-siRNA组)、阴性对照组(NT-siRNA组)及空白对照组(Blank组),AFAP1-AS1-siRNA组和NT-siRNA组采用Lipofectamine? 3000分别转染AFAP1-AS1-siRNA、NT-siRNA,Blank组加入PBST对照。CCK-8检测3组细胞增殖能力,Transwell实验检测侵袭能力,Western blotting检测Rho A、Cyclin D1和MMP-9蛋白的表达情况。结果:正常甲状腺细胞株FRTL-5、甲状腺癌细胞株SW579、CAL-62、FRO、WRO的AFAP1-AS1相对表达量分别为1.03±0.04、2.95±0.17、5.31±0.35、7.26±0.49、9.67±0.53,5组间比较差异具有统计学意义(
F=16.932,
P=0.027);AFAP1-AS1在WRO细胞中表达量最高,因此,选择WRO细胞进行后续实验。AFAP1-AS1-siRNA组、NT-siRNA组、Blank组3组细胞AFAP1-AS1的相对表达量分别为0.23±0.02、1.02±0.04、1.03±0.05,差异具有统计学意义(
F=13.590,
P=0.006),与NT-siRNA组相比,AFAP1-AS1-siRNA组AFAP1-AS1表达量
作者:程虎;刘名奎;陈天平
来源:国际肿瘤学杂志 2020 年 47卷 6期