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目的:探究转化生长因子(TGF-β)和细胞外调节蛋白激酶(ERK)/糖原合成酶激酶3β (GSK3β)信号通路激活与辐射诱导放射性肺炎大鼠肺泡上皮细胞间充质转化的关系.方法:6至8周龄的SD大鼠购自上海实验动物中心.90只实验大鼠随机分为3组:对照组(为正常饲养大鼠,每次只进行麻醉处理,n=30),放射诱导组(每次麻醉后进行钴-60伽马射线处理,处理持续两个星期,n=30)和U0126组(先试试辐射诱导再进行U0126腹膜内注射,n=30).通过透射电子显微镜观察肺泡上皮细胞的超微结构变化.采用PCR测量上皮间充质转化(EMT)相关蛋白mRNA的表达,免疫荧光分析Snail的易位潜力.ELISA测定法测量TGF-β、Smad2和Smad3浓度.采用蛋白质印迹测定ERK和GSK3β的磷酸化和总蛋白表达.结果:对照组中的肺泡上皮细胞含有丰富的线粒体,结构正常,而辐射诱导引起肺泡上皮细胞的超微结构改变,包括许多嵴断裂的线粒体,细胞器减少,以及液泡的增加.对照组中的大鼠肺泡上皮细胞显示出经典的上皮形态.辐射诱导后处理后,形态变为细长纺锤状.与对照组相比,辐射诱导组波形蛋白和α-SMA的mRNA水平增加,但E-钙粘蛋白mRNA的表达降低(P<0.05).与对照组相比,辐射增加了Snail(绿色荧光)的信号,并且大部分信号位于细胞核中.与对照组相比,辐射诱导组TGF-β、Smad2和Smad3

作者:谭化;季辉;李娜;张秀敬;贾营

来源:广西医科大学学报 2019 年 36卷 12期

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作者:
谭化;季辉;李娜;张秀敬;贾营
来源:
广西医科大学学报 2019 年 36卷 12期
标签:
转化生长因子-β ERK/GSK3β信号通路 肺泡上皮细胞 诱导放射性肺炎 上皮间充质转化
目的:探究转化生长因子(TGF-β)和细胞外调节蛋白激酶(ERK)/糖原合成酶激酶3β (GSK3β)信号通路激活与辐射诱导放射性肺炎大鼠肺泡上皮细胞间充质转化的关系.方法:6至8周龄的SD大鼠购自上海实验动物中心.90只实验大鼠随机分为3组:对照组(为正常饲养大鼠,每次只进行麻醉处理,n=30),放射诱导组(每次麻醉后进行钴-60伽马射线处理,处理持续两个星期,n=30)和U0126组(先试试辐射诱导再进行U0126腹膜内注射,n=30).通过透射电子显微镜观察肺泡上皮细胞的超微结构变化.采用PCR测量上皮间充质转化(EMT)相关蛋白mRNA的表达,免疫荧光分析Snail的易位潜力.ELISA测定法测量TGF-β、Smad2和Smad3浓度.采用蛋白质印迹测定ERK和GSK3β的磷酸化和总蛋白表达.结果:对照组中的肺泡上皮细胞含有丰富的线粒体,结构正常,而辐射诱导引起肺泡上皮细胞的超微结构改变,包括许多嵴断裂的线粒体,细胞器减少,以及液泡的增加.对照组中的大鼠肺泡上皮细胞显示出经典的上皮形态.辐射诱导后处理后,形态变为细长纺锤状.与对照组相比,辐射诱导组波形蛋白和α-SMA的mRNA水平增加,但E-钙粘蛋白mRNA的表达降低(P<0.05).与对照组相比,辐射增加了Snail(绿色荧光)的信号,并且大部分信号位于细胞核中.与对照组相比,辐射诱导组TGF-β、Smad2和Smad3