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目的 探讨结肠癌微小RNA-126(miR-126)的表达情况及其与高尔基体磷酸化蛋白3(GOLPH3)的关系.方法 选取10例结肠癌及相应正常结肠上皮组织标本,检测miR-126的表达水平.将miR-126的模拟物和阴性对照(N.C.)分别转染至HCT116细胞,48 h后检测细胞中GOLPH3 mRNA和蛋白的表达情况.采用生物学信息方法预测miR-126和GOLPH3是否在存在靶向作用关系.构建p-GOLPH33′-UTR和p-GOLPH33′-UTR mut两种报告基因质粒,与miR-126模拟物进行共转染结肠癌细胞HCT116,同时以未转染的HCT116细胞为空白对照,仅转染N.C.的HCT116细胞为阴性对照组,检测各组细胞的荧光强度.结果 结肠癌组织中miR-126的相对表达水平低于相应正常结肠上皮组织(P<0.05),转染miR-126模拟物的结肠癌细胞HCT116的GOLPH3 mRNA及蛋白表达水平均低于转染N.C.的结肠癌细胞HCT116.生物信息学分析结果提示miR-126与GOLPH3存在靶向作用关系.与空白对照组及阴性对照组比较,p-GOLPH3-3′UTR组的荧光值降低(P<0.05),但p-GOLPH3-3′UTR mut组的荧光值变化差异无统计学意义(P>0.05).结论 miR-126在结肠癌组织中表达下调,其通过调控GOLPH3在结肠癌细胞中的表达可能是结肠癌的发病机制之一.

作者:毛顺宝;马筱秋;王霖沛

来源:广西医学 2018 年 40卷 14期

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作者:
毛顺宝;马筱秋;王霖沛
来源:
广西医学 2018 年 40卷 14期
标签:
结肠肿瘤 微小RNA-126 高尔基体磷酸化蛋白3
目的 探讨结肠癌微小RNA-126(miR-126)的表达情况及其与高尔基体磷酸化蛋白3(GOLPH3)的关系.方法 选取10例结肠癌及相应正常结肠上皮组织标本,检测miR-126的表达水平.将miR-126的模拟物和阴性对照(N.C.)分别转染至HCT116细胞,48 h后检测细胞中GOLPH3 mRNA和蛋白的表达情况.采用生物学信息方法预测miR-126和GOLPH3是否在存在靶向作用关系.构建p-GOLPH33′-UTR和p-GOLPH33′-UTR mut两种报告基因质粒,与miR-126模拟物进行共转染结肠癌细胞HCT116,同时以未转染的HCT116细胞为空白对照,仅转染N.C.的HCT116细胞为阴性对照组,检测各组细胞的荧光强度.结果 结肠癌组织中miR-126的相对表达水平低于相应正常结肠上皮组织(P<0.05),转染miR-126模拟物的结肠癌细胞HCT116的GOLPH3 mRNA及蛋白表达水平均低于转染N.C.的结肠癌细胞HCT116.生物信息学分析结果提示miR-126与GOLPH3存在靶向作用关系.与空白对照组及阴性对照组比较,p-GOLPH3-3′UTR组的荧光值降低(P<0.05),但p-GOLPH3-3′UTR mut组的荧光值变化差异无统计学意义(P>0.05).结论 miR-126在结肠癌组织中表达下调,其通过调控GOLPH3在结肠癌细胞中的表达可能是结肠癌的发病机制之一.