目的 检测腺病毒携带成纤维细胞生长因子2(FGF2)转染骨髓间充质干细胞(BMSCs)后FGF2的表达情况并探索其对细胞增殖、分化及韧带相关特异性细胞外基质表达的影响.方法 将腺病毒进行细胞转染,转染后将细胞分为空白组(正常培养)、对照组[重组腺病毒(Ad.eGFP)转染]和试验组[空病毒(Ad.bFGF2-eGFP)转染].采用形态学、流式细胞仪观察、实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、蛋白质印迹法(WB)检测转染后BMSCs中FGF2的表达.并采用MTT法检测过表达FGF2后BMSCs增殖的变化.最后用qRT-PCR及WB检测BMSCs中带韧带相关特异性细胞外基质基因的表达水平.结果 试验组转染后FGF2表达最高,与空白组及对照组相比,差异有统计学意义(t=19.648,P＜0.001;t=17.506,P＜0.001);MTF结果示:在转染后第3天,与空白组及对照组相比,试验组可明显促进BMSCs的增殖,差异有统计学意义(t =3.401,P--0.015;t =3.234,P=0.018);过表达FGF2基因可明显上调BMSCs中特异性细胞外基质基因Ⅰ型胶原蛋白(Col Ⅰ)、Ⅲ型胶原蛋白(ColⅢ)、纤维连接蛋白(FN)、波形蛋白(Vimentin)及α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达.结论 FGF2能促进BMSCs的增殖并向腱细胞分化,腺病毒携带FGF2转染BMSCs有望成为组织工程韧带的种子细胞.
作者：陈志达；蔡弢艺；吴进；林斌；叶永贤
来源：中国骨与关节损伤杂志 2017 年 32卷 8期
