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应用PCR从大肠杆菌基因组中扩增L-阿拉伯糖异构酶基因,用EcoR I和Not I双酶切将其克隆进P.pastoris表达载体,获得重组表达载体pGAP9K-L-ai.通过电转法将pGAP9K-L-ai转化毕赤酵母GS115,筛选高G418抗性和高表达L-阿拉伯糖异构酶的重组工程菌.用葡萄糖作为碳源在摇瓶中发酵48 h,表达重组L-ai 53 mg/L.用毕赤酵母的GAP启动子调控表达的重组L-ai具有异构D-半乳糖生成D-塔格糖的生物学活性.

作者:符仙;陈丽萍;张爱联;崔艳艳

来源:工业微生物 2014 年 44卷 1期

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作者:
符仙;陈丽萍;张爱联;崔艳艳
来源:
工业微生物 2014 年 44卷 1期
标签:
L-阿拉伯糖异构酶 毕赤酵母 pGAP 基因表达 生物活性
应用PCR从大肠杆菌基因组中扩增L-阿拉伯糖异构酶基因,用EcoR I和Not I双酶切将其克隆进P.pastoris表达载体,获得重组表达载体pGAP9K-L-ai.通过电转法将pGAP9K-L-ai转化毕赤酵母GS115,筛选高G418抗性和高表达L-阿拉伯糖异构酶的重组工程菌.用葡萄糖作为碳源在摇瓶中发酵48 h,表达重组L-ai 53 mg/L.用毕赤酵母的GAP启动子调控表达的重组L-ai具有异构D-半乳糖生成D-塔格糖的生物学活性.