目的:用毕赤酵母表达L-阿拉伯糖异构酶.方法:用PCR法扩增大肠杆菌的L-阿拉伯糖异构酶基因,构建含L-阿拉伯糖异构酶基因的毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K-ai.通过电转法将pPIC9K-ai转化毕赤酵母GS115基因组.先筛选出高G418抗性的克隆,然后再从高拷贝的克隆中筛选出高表达重组L-阿拉伯糖异构酶的重组子作为工程菌GS115(pPIC9K-ai).结果:在甲醇诱导下,摇瓶发酵GS115(pPIC9K-ai)3d,分泌表达L-阿拉伯糖异构酶32 mg/L.结论:毕赤酵母表达的L-阿拉伯糖异构酶具有转化D-半乳糖为D-塔格糖的生物活性.每升GS115(pPIC9K-ai)发酵液能转化D-半乳糖生成30 mgD-塔格糖.
作者：陈丽萍；崔艳艳；张爱联
来源：生物技术 2013 年 23卷 1期
