本研究旨在优化重组大肠杆菌Escherichia coli BL21 (DE3) harboring pRSF-aad-ldh10-fdh菌株的培养条件,获得高密的供生物转化苯丙氨酸为苯乳酸的细胞.实验考察了摇瓶发酵培养基碳源、氮源种类和浓度,3L发酵罐中转速和通气量及恒速补料、DO-stat和pH-stat等不同分批补料策略对菌体密度的影响.结果 表明,当碳源为4 g/L葡萄糖,氮源为24 g/L安琪酵母浸粉FM802,细胞干重最大可达9.24 g/L;当转速为400 r/min和通气量为1.5 vvm时,细胞干重最大可达10.18g/L;以4 g/(L·h)恒速流加葡萄糖时,细胞干重最大可达13.71 g/L.本研究还对工程菌酶表达的诱导条件进行了优化,菌体培养2h后,添加终浓度为0.08 mmol/L IPTG诱导剂,在25℃下诱导培养14 h所得细胞有利于生物转化.底物苯丙氨酸浓度为60 g/L,转化为苯丙酮酸的转化率为50.2％,转化为苯乳酸的转化率为35.2％.
作者：刘周玭；王淼
来源：工业微生物 2019 年 49卷 4期
