目的将人工合成具有乳酸菌偏好密码子的苯丙氨酸脱氨酶基因(PALart),在乳酸乳球菌中克隆并进行食品级表达,以期进一步用于治疗苯丙酮尿症的研究.方法以欧芹苯丙氨酸脱氨酶氨基酸序列为准,人工合成以乳酸菌偏爱密码子编码相同氨基酸序列的基因PALart,将该基因克隆到食品级乳酸乳球菌高效表达系统pNZ8149/NZ3900中而获得基因工程菌,用HPLC法测定诱导表达出的苯丙氨酸脱氨酶活性.结果获得了能表达苯丙氨酸脱氨酶活性的阳性克隆pNZ8149-PALart/NZ3900.该酶的表达量与诱导物乳链菌肽的浓度有关.反应液pH值能明显影响工程菌转化苯丙氨酸为肉桂酸的转化率;以10 mmol/L的苯丙氨酸作为底物,在pH8.0的磷酸盐缓冲液中,于37℃反应18 h,其转化率可达64
作者:贾兴元;陈星;苏畅;吕月平;高斌;肖白;刘敬忠
来源:中华微生物学和免疫学杂志 2006 年 26卷 1期