本研究目的是应用PCR法快速筛查插入有苯丙氨酸脱氨酶(PAL)cDNA重组阳性克隆.用于PCR扩增的引物是位于载体pET23b启动子处的T7启动子引物和位于目的基因PALc DNA3'端终止密码TAA处的引物.以灭菌吸头挑一单菌落加入PCR体系扩增.结果:在筛查的3个克隆中,有2个阳性克隆,并且插入方向正确,经DNA序列测定得到进一步证实.结果表明,以PCR方法筛查重组阳性克隆,可以简便快速鉴定插入片段的大小和方向,不需提取质粒.
作者:胡维;向华;周艳;刘敬忠
来源:生物技术通报 1999 年 15卷 6期