目的：建立一种幽门螺杆菌（ H. pylori）临床菌株的分离培养的方法。方法：取临床胃黏膜组织标本88株，接种于10％绵羊全血的哥伦比亚选择性培养基上，37℃、5％ O2、10％ CO2、85％ N2培养3~5 d后，挑取血平板上透明细小可疑菌落进行革兰氏染色和尿素酶试验，对阳性菌落进行扩大纯培养，提取细菌 DNA，PCR扩增H. pylori 16sRNA、CagA基因，电泳并进行测序鉴定。结果：成功从临床胃黏膜组织中分离培养出H. pylori，88例胃黏膜组织标本中分离培养并鉴定出H. pylori 19株，阳性率为22％；对16sRNA及CagA基因进行扩增，电泳可见目的条带，并对16sRNA扩增产物测序，与H. pylori国际标准菌株26695比对，同源性为95％~99％。结论：37℃、5％ O2、10％ CO2、85％ N2条件下10％绵羊全血的哥伦比亚选择性培养基上能成功分离培养出H. pylori临床株。
作者：刘正美；周建奖；赵艳；熊林；龙妮娅；谢渊
来源：贵阳医学院学报 2016 年 41卷 4期
