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目的:探究MicroRNA-199a-5p通过靶向激酶β(IKKβ)-核因子κB(NF-κB)信号通路影响口腔鳞状细胞癌细胞上皮间质转化及侵袭转移的机制.方法:将离体培养的SCC-25、CAL-27、TCA-8113、SCC-4 OSCC和293口腔鳞状细胞癌细胞分为空白对照组(n=24)、NC模拟组(n=24)和miR-199a-5p模拟物组(n=24).逆转录定量聚合酶链反应(RT-qPCR)分析miR-199a-5p和IKKβ的转录水平,CCK-8法检测细胞增殖水平,流式细胞仪检测细胞凋亡和周期分布,蛋白质印迹法检测抗IKKβ、总p65、核磷酸化(p-)p65、NF-κB(IκB)-α抑制剂、p-IκB-α、组蛋白H3、β-肌动蛋白及α-微管蛋白的表达水平,荧光素酶测定试剂盒定量检测NF-κB活性,进行Tran-swell迁移和侵袭分析肿瘤细胞的侵袭和迁移能力.结果:在OSCC细胞中miR-199a-5p表达下调(P<0.01);与无淋巴结转移的细胞比较,有淋巴结转移的OSCC细胞中miR-199a-5p表达降低(P<0.05);OSCC细胞SCC-25、CAL-27、TCA-8113和SCC-4中miR-199a-5p下调(P<0.05);RTPCR分析显示,与TCA-8113和SCC-4细胞的NC对照组比较,用miR-199a-5p模拟物转染后,miR-199a-5p的表达上调;CCK 8分析表明,与模拟NC转染的细胞比较,miR-199a-5p模拟物转染抑制了细胞活力,在TCA-8113和SCC-4细胞中观察到的凋亡诱导;流式细胞仪分析的结果表明

作者:卢静;李杰;张莹;吴栋材

来源:贵州医科大学学报 2020 年 45卷 11期

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作者:
卢静;李杰;张莹;吴栋材
来源:
贵州医科大学学报 2020 年 45卷 11期
标签:
口腔鳞状细胞癌 肿瘤侵润 肿瘤转移 靶向激酶β-核因子κB信号通路 上皮间质转化
目的:探究MicroRNA-199a-5p通过靶向激酶β(IKKβ)-核因子κB(NF-κB)信号通路影响口腔鳞状细胞癌细胞上皮间质转化及侵袭转移的机制.方法:将离体培养的SCC-25、CAL-27、TCA-8113、SCC-4 OSCC和293口腔鳞状细胞癌细胞分为空白对照组(n=24)、NC模拟组(n=24)和miR-199a-5p模拟物组(n=24).逆转录定量聚合酶链反应(RT-qPCR)分析miR-199a-5p和IKKβ的转录水平,CCK-8法检测细胞增殖水平,流式细胞仪检测细胞凋亡和周期分布,蛋白质印迹法检测抗IKKβ、总p65、核磷酸化(p-)p65、NF-κB(IκB)-α抑制剂、p-IκB-α、组蛋白H3、β-肌动蛋白及α-微管蛋白的表达水平,荧光素酶测定试剂盒定量检测NF-κB活性,进行Tran-swell迁移和侵袭分析肿瘤细胞的侵袭和迁移能力.结果:在OSCC细胞中miR-199a-5p表达下调(P<0.01);与无淋巴结转移的细胞比较,有淋巴结转移的OSCC细胞中miR-199a-5p表达降低(P<0.05);OSCC细胞SCC-25、CAL-27、TCA-8113和SCC-4中miR-199a-5p下调(P<0.05);RTPCR分析显示,与TCA-8113和SCC-4细胞的NC对照组比较,用miR-199a-5p模拟物转染后,miR-199a-5p的表达上调;CCK 8分析表明,与模拟NC转染的细胞比较,miR-199a-5p模拟物转染抑制了细胞活力,在TCA-8113和SCC-4细胞中观察到的凋亡诱导;流式细胞仪分析的结果表明