目的:研究丹参酚酸 B 和山楂黄酮对游离脂肪酸诱导大鼠肝细胞脂质沉积和凋亡的作用及其机制。方法采用肝脏原位胶原酶灌注法分离大鼠原代肝细胞,油酸:棕榈酸=2:1造模。原代肝细胞和 HepG2均分为正常对照组、模型组、模型+丹参酚酸 B 组、模型+山楂黄酮组、模型+丹参酚酸 B+山楂黄酮组、模型+SP600125组、丹参酚酸 B 组、山楂黄酮组、丹参酚酸 B+山楂黄酮组、SP600125组、DMSO 对照组。游离脂肪酸刺激原代肝细胞的浓度为250μmol/L、刺激 HepG2的浓度为500μmol/L;丹参酚酸 B 的浓度为1μmol/L;山楂黄酮的浓度为5μg/mL;SP600125的浓度为10μmol/L。观察①油红 O 染色:丹参酚酸 B 和山楂黄酮对游离脂肪酸刺激的肝细胞内脂滴变化的影响;②ELISA 法:丹参酚酸 B 和山楂黄酮对游离脂肪酸诱导的肝细胞凋亡的影响;③高内涵筛选 Hoechst33258染色:丹参酚酸 B 和山楂黄酮对游离脂肪酸诱导的肝细胞凋亡的影响;④Western blot:丹参酚酸 B 和山楂黄酮对游离脂肪酸刺激的肝细胞内 p-JNK 表达的影响。结果①油红 O 染色显示:与正常对照组比较,游离脂肪酸作用于原代肝细胞、HepG2细胞24 h 后,细胞内脂滴含量显著增加(P 均<0.01)。丹参酚酸和山楂黄酮可显著减少游离脂肪酸诱导的原代肝
作者:薛冬英;袭渤人;张洁;叶军
来源:肝脏 2016 年 21卷 3期