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[目的]探讨中药淫羊藿、巴戟天提取物(中药注射液喘可治的组成)对恒河猴单核衍生的巨噬细胞在未极化(M0)、M1极化条件下基因表达的影响,分析其可能的免疫调节的作用机制.[方法]采用密度梯度离心法分离中国恒河猴外周血单个核细胞(PBMCs),采用贴壁法纯化出单核细胞,并以粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)刺激5d以使单核细胞分化成巨噬细胞;然后不加入极化因子(M0)或以干扰素γ(IFN-γ,继续培养2d)诱导巨噬细胞极化为M1表型,同时分别加入淫羊藿、巴戟天提取物进行干预;然后提取mRNA并逆转录后,采用实时荧光定量PCR检测CCR5、CD4、CTLA-4、FoxP3、IDO、IL-10、TGF-β等基因表达量.[结果]与空白对照组比较,加入巴戟天提取物培养的M0巨噬细胞基因表达上调不明显;经淫羊藿提取物培养的M0巨噬细胞,CCR5基因表达量上调4.21倍,TGF-β上调7.66倍,FoxP3、IL-10轻度上调,而CD4、CTLA-4、IDO等基因表达改变倍数无明显变化.经巴戟天提取物刺激的M1型巨噬细胞,CTLA-4基因表达量上调3.22倍,FoxP3上调3.69倍,CCR5、CD4、IL-10、IDO基因改变倍数均无明显变化,TGF-β未测出;而由淫羊藿提取物刺激的M1型巨噬细胞,IL-10的表达量上调11.83倍,FoxP3上调4.55倍,IDO、CCR5、CD4、CTLA-4基因改变倍数无明显变化,TGF-β未测出.[结

作者:成业;陈颂;王晓玉;熊思艺;符林春

来源:广州中医药大学学报 2016 年 33卷 4期

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作者:
成业;陈颂;王晓玉;熊思艺;符林春
来源:
广州中医药大学学报 2016 年 33卷 4期
标签:
巨噬细胞 淫羊藿 巴戟天 免疫调节 基因表达调控 恒河猴 macrophages Herba Epimedii (Yinyanghuo) Radix Morindae officinalis (Bajitian) immune regulation gene expression regulation rhesus monkeys
[目的]探讨中药淫羊藿、巴戟天提取物(中药注射液喘可治的组成)对恒河猴单核衍生的巨噬细胞在未极化(M0)、M1极化条件下基因表达的影响,分析其可能的免疫调节的作用机制.[方法]采用密度梯度离心法分离中国恒河猴外周血单个核细胞(PBMCs),采用贴壁法纯化出单核细胞,并以粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)刺激5d以使单核细胞分化成巨噬细胞;然后不加入极化因子(M0)或以干扰素γ(IFN-γ,继续培养2d)诱导巨噬细胞极化为M1表型,同时分别加入淫羊藿、巴戟天提取物进行干预;然后提取mRNA并逆转录后,采用实时荧光定量PCR检测CCR5、CD4、CTLA-4、FoxP3、IDO、IL-10、TGF-β等基因表达量.[结果]与空白对照组比较,加入巴戟天提取物培养的M0巨噬细胞基因表达上调不明显;经淫羊藿提取物培养的M0巨噬细胞,CCR5基因表达量上调4.21倍,TGF-β上调7.66倍,FoxP3、IL-10轻度上调,而CD4、CTLA-4、IDO等基因表达改变倍数无明显变化.经巴戟天提取物刺激的M1型巨噬细胞,CTLA-4基因表达量上调3.22倍,FoxP3上调3.69倍,CCR5、CD4、IL-10、IDO基因改变倍数均无明显变化,TGF-β未测出;而由淫羊藿提取物刺激的M1型巨噬细胞,IL-10的表达量上调11.83倍,FoxP3上调4.55倍,IDO、CCR5、CD4、CTLA-4基因改变倍数无明显变化,TGF-β未测出.[结