目的:采用分子杂交及PCR方法,分析鸭α-干扰素基因的表达及多态性.方法:从鸭外周血分离出的单核细胞在体外经PHA(5 μg/ml)刺激不同时间后,提取总RNA.以RT-PCR方法检测鸭α-干扰素(DuIFN-α)mRNA表达状况.引物根据最近公布的DuIFN-α基因序列设计.从鸭外周血单核细胞中提取的基因组DNA经限制性内切酶BamHI, HindIII, PstI, XbaI消化后,以公布的DuIFN-α序列为探针,采用Southern杂交分析DuIFN-α基因的多样性.结果:在未经PHA刺激的鸭外周血单核细胞(PBMCs)中,未检测到DuIFN-α表达;PHA刺激4 h后,即可检测到DuIFN-α表达,一直持续到24 h.基因组DNA限制性内切酶多态性分析表明,PstI酶切后,出现片段大小各异的杂交信号,提示DuIFN-α存在多样性.结论:鸟类α-干扰素基因与哺乳动物类似,也具有多样性.
作者:黄爱龙;Allison Jilbert;Ieva Kotlarski
来源:中国免疫学杂志 2000 年 16卷 12期