目的在毕赤酵母中高效分泌表达复合干扰素.方法根据毕赤酵母密码子偏性合成了复合干扰素基因,克隆至分泌型酵母表达载体pMEX9K,线性化后转化毕赤酵母GS115,筛选高表达菌株.诱导后的培养上清经过离子交换,疏水层析,凝胶过滤三步层析纯化,用细胞病变抑制法测定其活性,并结合lowry法蛋白定量计算其比活性.结果SDS-PAGE分析显示,重组蛋白以可溶性分子的形式存在于上清液中,经纯化后纯度达到96
作者:于长明;齐连权;来大志;张晓鹏;孔毅荣;于婷;付玲;陈薇
来源:免疫学杂志 2004 年 20卷 2期