目的:在巴斯德毕赤酵母中表达及纯化人ω干扰素(interferon ω, IFN-ω)以对其功能进行深入研究.方法:用PCR方法扩增人IFN-ω基因,与分泌型酵母表达载体pMEX9K重组,经酶切、PCR和序列测定证实重组表达载体pMEX9Kω构建正确.将重组载体pMEX9Kω用SalⅠ酶切后,转化毕赤酵母GS115.得到的转化子经诱导表达后在发酵上清中有人IFN-ω的表达,表达量为4×109 U/L.经过 Butyl Sepharose 4 FF疏水层析柱,SP Sepharose FF离子交换柱和Superdex 75凝胶过滤三步层析纯化,利用反相HPLC分析纯化的重组蛋白.结果:得到了纯度>99
作者:齐连权;付玲;于长明;于婷;徐春娥;王海涛;陈薇
来源:军事医学科学院院刊 2003 年 27卷 4期