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目的 研究1α,25-二羟维生素D3[1α,25-(OH)2D3]对体外培育SD大鼠成骨细胞(OB)增殖、分化和细胞核因子κ配体(RANKL)及骨保素(OPG) mRNA表达的影响.方法 采用胰蛋白酶和胶原酶消化法从24 h新生SD乳鼠颅盖骨分离得到的OB,经1mol/L、10nmol/L、100 nmol/L的1α,25-(OH)2D3干预24h、48 h和72h后,MTT比色法检测OB增殖率;PNPP法测定碱性磷酸酶(ALP)活性;应用RT-PCR法检测细胞中OPG和RANKL的mRNA表达.结果 1nmol/L组成骨细胞A值在干预24 h、48 h、72 h后,分别为(0.335±0.080)、(0.451±0.086)、(0.545±0.085); 100 nmol/L组OB ALP活性分别增加至(6.274±1.561) U/g、(5.021±1.703) U/g、(6.854±1.468) U/g;OPG mRNA表达分别降低至(0.365±0.068)、(0.340±0.046)、(0.381±0.051);RANKL mRNA表达分别增加至(0.622±0.089)、(0.550±0.064)、(0.468±0.062);与0 nmol/L组比较,RANKL/OPG比值分别增加138.53%、153.45%、157.71%,差异均具有统计学意义(P<0.05).结论 高浓度1α25-(OH)2D3可抑制OB增值和OPG mRNA表达,促进其分化和矿化,上调RANKL/OPG的基因表达,从而促进破骨细胞介导的骨吸收,增强骨更新.

作者:沈小辉;杨菲;李功波;梁晓翠;谢龙宇;陈筱诗;唐文娟

来源:海南医学 2014 年 25卷 1期

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沈小辉;杨菲;李功波;梁晓翠;谢龙宇;陈筱诗;唐文娟
来源:
海南医学 2014 年 25卷 1期
标签:
1α,25-二羟维生素D3 成骨细胞 增殖分化 细胞核因子κ配体 骨保素 1α,25-(OH)2D3 Osteoblast Proliferation and differentiation Nuclear factor kappa ligand Osteoprotegerin
目的 研究1α,25-二羟维生素D3[1α,25-(OH)2D3]对体外培育SD大鼠成骨细胞(OB)增殖、分化和细胞核因子κ配体(RANKL)及骨保素(OPG) mRNA表达的影响.方法 采用胰蛋白酶和胶原酶消化法从24 h新生SD乳鼠颅盖骨分离得到的OB,经1mol/L、10nmol/L、100 nmol/L的1α,25-(OH)2D3干预24h、48 h和72h后,MTT比色法检测OB增殖率;PNPP法测定碱性磷酸酶(ALP)活性;应用RT-PCR法检测细胞中OPG和RANKL的mRNA表达.结果 1nmol/L组成骨细胞A值在干预24 h、48 h、72 h后,分别为(0.335±0.080)、(0.451±0.086)、(0.545±0.085); 100 nmol/L组OB ALP活性分别增加至(6.274±1.561) U/g、(5.021±1.703) U/g、(6.854±1.468) U/g;OPG mRNA表达分别降低至(0.365±0.068)、(0.340±0.046)、(0.381±0.051);RANKL mRNA表达分别增加至(0.622±0.089)、(0.550±0.064)、(0.468±0.062);与0 nmol/L组比较,RANKL/OPG比值分别增加138.53%、153.45%、157.71%,差异均具有统计学意义(P<0.05).结论 高浓度1α25-(OH)2D3可抑制OB增值和OPG mRNA表达,促进其分化和矿化,上调RANKL/OPG的基因表达,从而促进破骨细胞介导的骨吸收,增强骨更新.