目的 探讨siRNA扰赖氨酰氧化酶基因(LOX)后对鼻咽癌细胞5-8F的体外增殖的影响.方法 设计并构建针对LOX基因的siRNA段,脂质体介导SiRNA-LOX-01 (SiRNA-LOX-01组)和SiRNA-LOX-02 (SiRNA-LOX-02组)转染5-8F细胞,同时设非特异性干扰片段为对照组.应用实时荧光定量PCR、免疫印迹试验检测转染后各组LOX mRNA和蛋白表达及Ki-67、PCNA、CDK4、P21、CCND1表达变化;MTT实验、平板克隆形成实验及流式细胞周期实验分别研究LOX基因沉默后对5-8F细胞增殖能力的影响.结果 与对照组比较, SiRNA-LOX-01组和SiRNA-LOX-02组LOX表达在mRNA及蛋白水平上均明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组相比,siRNA-LOX细胞的增殖速度变慢,单克隆形成数量减少,细胞周期中G0/G1期细胞的比例显著升高,差异有显著统计学意义(P<0.01);与对照组相比,SiRNA-LOX-01组和SiRNA-LOX-02组细胞中抗原Ki-67、增殖细胞核抗原(PCNA)、周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)、细胞周期蛋白D1(CCND1)的表达均降低,P21表达量升高,差异均有显著统计学意义(P<0.01).结论 干扰LOX能明显抑制鼻咽癌细胞的增殖能力,其作用机制可能与Ki-67、PCNA、CDK4及CCND1蛋白表达下调,P21蛋白表达上调有关,LOX有望成为治疗鼻咽癌的有效靶点.
作者：梁毅；夏林；费新雄；董克臣；柯素颖
来源：海南医学 2018 年 29卷 9期
